产物列表PRODUCTS LIST
?乳酸脱氢酶(尝顿贬)活性微量法测定的原理?是通过检测尝顿贬催化丙酮酸还原为乳酸的过程中狈础顿贬的生成量来间接测定尝顿贬的活性。
更新时间:2025-04-11
?乳酸脱氢酶(LDH)活性微量法测定的原理?是通过检测LDH催化丙酮酸还原为乳酸的过程中NADH的生成量来间接测定LDH的活性。
具体过程如下:
?反应原理?:在LDH的作用下,NAD+被还原生成NADH。NADH与WST-8相互作用产生颜色,从而进行比色测定(λmax=450 nm)?。
?反应条件?:LDH将NAD还原为NADH,NADH与WST-8相互作用产生颜色。这个反应在冰上避光进行,各组分(如Assay Buffer、Lactate、NAD、WST-8、Enhancer)需在实验前从冰箱中取出并平衡至室温,整个过程需避光操作?。
?吸光度测量?:在450 nm波长下测量吸光度,吸光度与LDH活性成正比,可以通过比色法测定LDH的活性?。
?实验步骤和所需设备?:
?实验步骤?:准备工作液(1×Assay Buffer、NAD、WST-8、Enhancer和Lactate混合均匀),将工作液加入96孔板或微量玻璃比色皿中,加入待测样品,37℃恒温孵育一定时间后测量吸光度?。
?所需设备?:酶标仪或可见分光光度计(能测450 nm处的吸光度)、恒温箱、制冰机、低温离心机、96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、去离子水、匀浆器(如果是组织样本)?。
实验注意事项?:
?试剂保存?:各组分(如Assay Buffer、Lactate、NAD、WST-8、Enhancer)需在冰上避光保存,避免反复冻融?。
?操作注意事项?:整个实验过程需在冰上避光进行,避免光照影响结果?。