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在双抗夹心法ELISA中，质控品是确保检测结果准确性和可靠性的关键组成部分。它们通常作为已知浓度或状态的样本参与整个实验流程，用于监控试剂性能和操作稳定性。
双抗夹心法ELISA质控品制备需通过以下步骤实现：
1.质控品原料选择
使用高纯度目标蛋白（如布鲁氏菌4A12抗体）或灭活菌液（如志贺氏菌1×10^5 CFU/mL）
需验证原料的稳定性与活性，如纳米抗体CPB-VHH半衰期2.152小时
2.质控品制备流程
?稀释体系?：采用PBS缓冲液或5%脱脂奶粉封闭液
?梯度稀释?：标准品需进行1:2,000至1:60,000倍稀释
?分装保存?：-20℃冻存，避免反复冻融
3.质控品验证标准
?灵敏度?：锄耻颈低检出限需达0.375 ng/mL（PTL检测）或2.56 pg/mL（肉毒毒素）
?精密度?：批内/批间CV应<10%
?特异性?：与近缘菌株无交叉反应
4.操作注意事项
包被条件：4℃过夜，5%脱脂奶粉封闭2小时
检测抗体：HRP标记抗体稀释1:2,000
显色时间：15分钟（PTL检测）或20分钟（肺炎支原体）
质控品的作用与类型
根据免疫测定的通用原则，质控品主要分为以下两类：
阳性对照：
作用：评判当次检测的准确性与有效性。
常见形式：含有已知浓度目标抗原的标准品溶液，或经验证为阳性的生物样本（如血清）。
阴性对照：
作用：检测是否存在非特异性结合或污染，避免假阳性。
常见形式：空白孔（只加稀释液）、不含目标抗原的缓冲液，或已知不含有受检物质的样本。
一个可靠的ELISA实验必须设置阳性及阴性对照来评估试剂盒和检测过程的客观性与可信性。商业化的ELISA试剂盒通常会直接提供这些质控品。
